第41回日本DDS学会学術集会にてポスター発表を実施しました。【新規生体適合性DDSポリマー（PGLMMA）で修飾したmRNA-LNPを用いたin vivo発現確認およびin vitro発現に影響する因子の検討】

2025年6月17日(火)・18日(水)に幕張メッセで開催された第41回日本DDS学会年会においてポスター発表を行いましたので、抄録に掲載した内容をご紹介いたします。 

発表内容

演　題	新規生体適合性DDSポリマー（PGLMMA）で修飾したmRNA-LNPを用いたin vivo発現確認およびin vitro発現に影響する因子の検討
演　題（英）	Studies on in vivo gene expression of mRNA-LNP modified with a novel biocompatible DDS polymer and on the factor contributing to in vitro expression.
発 表 者	株式会社日本触媒　健康・医療事業推進本部　健康・医療研究開発部 今瀬 将人/Masato Imase

※PGLMMA は、poly（glycerol monomethacrylate）の略称です。

緒言

ナノ粒子製剤においては、製剤の凝集抑制や体内でのステルス性付与を目的に親水性ポリマーの表面修飾が汎用される。ところが近年、ポリマーに対する抗体産生が確認され、非免疫原性ポリマーへの希求が高いことから、我々は新規DDSポリマーである両親媒性ポリマー（C₁₈-PGLMMA）の開発を進めている。PGLMMA修飾リポソームはマウスに投与しても抗体産生が起こりにくく、ABC現象も起こりにくい。また、脂質組成を最適化したPGLMMA修飾LNP-mRNA（修飾LNP）において、in vitroでmRNAが高発現する事を2024年度の学術集会にて報告した。今回の検討では、PGLMMA修飾LNPのin vivoでの発現確認と、in vitro発現に影響する因子について検討を行ったので報告する。

実験方法

モデルmRNAとして、ルシフェラーゼ（Luc）をコードするmRNA（Luc-mRNA）を用いた。mRNAを内包した修飾LNPをマウスに尾静脈より投与し、一定時間後に基質を投与した際の発光量をIVISにて測定した。in vitro発現試験にはヒト乳がん細胞株（MCF-7）を用い、各種試験物質を一定時間作用させた後にLNPを添加、またはLNPの添加と同時に試験物質を添加し、一定時間培養後に基質を添加して発光強度を測定した。

実験結果と考察

マウスへの投与後4h、24hにおいてルシフェリン発光が肝臓で確認され、72hにおいては発光がほぼ消失した。この間、被験物質投与による体重減少は見られなかった。この結果から、修飾LNPを投与する事でin vivoでもタンパク質発現が起こる事が確認された。修飾LNPのin vitro高発現の現象解明として実施した各種添加物の影響検討において、glucoseやdexamethasoneの添加は修飾LNPの細胞取込みを増強し、CuSO₄添加は即時的かつ顕著に取込みを減少させた。これらの物質添加による細胞内の変化が修飾LNPの取込み制御に関わっていることを示唆している。今後、in vivoでの発現をより向上させるLNP組成の検討と、in vitroでの修飾LNP高発現のメカニズム解明の実施を予定している。

学会概要

学会名	第41回日本DDS学会学術集会
会　期	2025年6月17日（火）～ 6 月 18 日（水）
会　場	幕張メッセ国際会議場
公式サイト	HOME | 第41回日本DDS学会学術集会